头孢哌酮钠超声电导透皮给药兔血及肺组织药物的观测

1  材 料
     1 1 仪 器
    HP1100紫外检测器（波长254nm）（ 日 本 ） ；  YKH－ Ⅱ 型 液 体 快 速 混 合 器 （ 江 西 医 疗 器 械 厂 ） ；TGL－ 16G高 速 离 心 机 （ 上 海 医 用 分 析 仪 器 厂 ） ；S PSS10.0统计 软 件 ； 超声电导仪（北京诺亚同舟医疗技术有限公司）。
     1 2 试 药
     注 射 用 头 孢 哌 酮 钠 （ 海 南 三 洋 德 林 药 业 有 限 公 司 ， 批 号：0101101， 规 格 ： 1g/瓶 ） ； 他 唑 哌酮 （ 海 南 三 洋 德 林 药 业 有 限 公 司 ， 批 号 ：0101103， 规 格 ： 1g/瓶 ） ； 头 孢 哌 酮 钠 对 照 品 （ 海 南 三 洋 德 林 药 业 有 限 公 司 ， 含 量≥ 9 9.7％ ） ； 甲 醇 、 乙 腈 为 色 谱 纯， 三 乙 胺 、 冰 醋 酸 等 为 分 析 纯 ， 水 为 重 蒸 水 。
     1 3 动 物
     健 康 家 兔 10只 ， 雌 雄 各 半 ，体 重2 kg～ 2.5 kg， 实 验 前 和 实 验 中 未使 用 过 其 它 药 物 。
     2   方 法 与 结 果
     2.   1分析方法和条件

将制备好的标本用HP1100紫外检测器进行分析，分析条件C18注（规格4.6*33mm注直径10um），流动相：甲醇：乙酸醇=3：1，流速1ml/min。

采 用 反 相 高 效 液 相 色 谱 法 测 定 头 孢 哌 酮 钠 的 血 药和肺组织浓 度 ， 参 照 文 献 和 药 典 方 法 [1， 2]， 调 节 流 动 相 pH为 5.4。 在 该 色 谱 条 件 下 ， 头 孢 哌 酮 钠 的 分 离 度 和 峰 形 均 较 满 意 。 经 紫 外 扫 描 确 定 ， 头 孢 哌 酮 钠 在 230nm处 有 最 大 吸 收 ， 以 此 确 定 230 n m为 检 测 波 长 。

         2. .2 样本采集

10只健康家兔，雌雄配对，随机分成观测组和对照组，每组5只。观测组将0.5g头孢哌酮钠注入超声电导仪发射头的凝胶贮库内，选择家兔背部去毛的部位进行局部药物透入，设定电致孔强度4，超声波强度6，作用时间15分钟；对照组采用耳缘静脉注射0.5g头孢哌酮钠，分别于即刻、3小时、6小时抽取静脉血2ml和肺组织０.5g。

2.3样本制备

血标本制备：抽取静脉血2ml，静置取血清0.45ml,加入0.6mol/l高氯酸溶液0.5ml，漩涡震荡1分钟，4000转/分离心10分钟，取上清液。

组织标本的制备：取0.5g组织加入10倍的生理盐水后在组织倒碎机中打成匀浆，低温离心（4000转/分）10分钟，取上清液0.45ml, 加入0.6mol/l高氯酸溶液0.5ml，漩涡震荡1分钟，4000转/分离心10分钟，取上清液。

2.4统计学处理

对两组样本计量资料进行t检验，应用SPSS10.0软件包进行统计分析。

3 结果

观察组和对照组血及肺组织药物浓度比较结果见表1，

治疗组                               对照组

 


    血             肺组织                 血            肺组织

            

即刻  3小时  6小时     即刻  3小时  6小时     即刻  3小时  6小时     即刻  3小时  6小时

6.02   11.43  2.10     124.3  101.31  10.01       216.71 66.37  2.52    938.85 250.14   9.8

5.69   9.29   2         111.1  102.85  11.76   255.48  101.62 1.64    1074.92   864.93  30.5

6.14  3.65  0.16       122.1  116.93  12.32    300.05    182.2  2.3   2623.61  1642.6   40.9

5.07 3.03  1.29        147.3  124.52  8.7         215.82 19.06 2.71   1617.11 1607.32   30.8

5.47  3.65  2.1       102.4  91.3   7.8          249.84 42.49  1.49   1340.02  842.71  16.5

治疗组中血和肺组织的药物浓度在即刻、3小时、6小时比较：t=9.79，5.32，5.75；P1＜0.001，P2＜0.001，P3＜0.001

对照组与治疗组肺组织的药物浓度在即刻、3小时、6小时比较：t=5.269，4.612，4.597；P1＜0.001，P2＜0.001，P3＜0.001

治疗组和对照组的血、肺组织在即刻、3小时、6小时测定的药物浓度的基本变化趋势如图1-4。

 
图1  治疗组血药浓度（纵坐标单位:μg/ml;横坐标单位:1表示即刻，2表示3小时，3表示6小时）


   图2  对照组血药浓度（纵坐标单位:μg/ml;横坐标单位: 1表示即刻，2表示3小时，3表示6小时）

图3  治疗组肺组织药物浓度（纵坐标单位:μg/ml;横坐标单位: 1表示即刻，2表示3小时，3表示6小时）

 

 


图4   对照组肺组织浓度（纵坐标单位:μg/ml;横坐标单位: 1表示即刻，2表示3小时，3表示6小时）

讨论

超声电导给药治疗技术综合采用电致孔、超声空化和离子导入三种技术并有机的结合起来，起到相互协同和叠加的作用。在高压脉冲电流的作用下，皮肤和组织的膜结构的脂质颗粒重新排列，由无序变为有序，进而产生潜在的可逆性的水性生物孔道，研究表明电致孔使药物的透皮速率大大增加，并明显延长药物透皮过程滞留的时间，更重要的是促进了药物分子由细胞外向细胞内的转运[4,5,6,7]；超声波通过空化作用、声波微流的对流转运作用和辐射压作用可使皮肤、组织膜形成或\和扩大已形成孔道，使其的通透性增加，同时可使药物粒子获得定向运动的动能，使药物分子和粒子沿着声波传播方向运动，从而实现给药的最优化[8]；现代离子导入克服了传统离子导入的诸多不足，在许多原来不能自然渗透的药物如蛋白质、肽类、核酸物质和中药大分子胶体颗粒得以实现透皮，在与电致孔、超声空化的配合下，其导入效率大大增加。

在本组实验中，对照组头孢哌酮钠血药浓度在静脉注射后迅速上升后快速下降，表明静脉给药在机体中血药浓度高且变化大，这是静脉给药导致全身各种毒、副反应的主要机制之一，这一点在国内外诸多这献业已得到证实[4]。超声电导经皮给药对血药浓度的影响则是缓慢上升然后逐渐下降，但其血药浓度一直处于极低水平，说明超声电导经皮给药法导入药物极少进入血液，并很快被代谢，一方面保证了药物能够在局部高效浓集，一方面又大大减少了药物进入血液循环，从而最大程度减少了药物的全身各种毒、副作用。

在本组实验中，治疗组肺组织浓度在3小时内浓度极快上升到高峰，并缓慢下降，说明头孢哌酮钠在超声电导导入后在肺组织中浓度高度聚集，这保证了药物能够在特定靶组织中靶向浓集的药效的发挥提供了充分的前提条件 ，另一方面也从侧面证实了药物很少进入血液循环而被带走，间接反应了其血药浓度必定极低，这一点已被血药浓度的测定所证实。

从本实验中我们观察到，超声电导被给头孢哌酮钠在肺组织中可高浓集，为药物的疗效发挥提供了良好的前提基础，而血药浓度极低则大大减少药物的全身毒、副作用。预示此种给药方式必将成为新一代给药方式，并有着良好的临床运用前景。

 参考文献：

[1] 裴 保 香 ， 谭 次 娥 ，孙 效 东 ， 等 孢 哌 酮 的 药 物 动 力 学 及 药 效 学 [J]中 国 临 床 药 学 杂 志 ， 1998， 7（ 5） ： 211

[2] 商 澎 ， 陈 槟 复 ， 徐 明 达 血 清 和 组 织 间 液 中 头 孢 哌 酮 钠 的 高 效 液 相 色 谱 测 定 方 法 [J]药 物 分 析 ， 1992， 12（ 6） ：327
  [3] 国 家 药 典 委 员 会 编 中 华 人 民 共 和 国 药 典 （ 二 部 ） [S] 2000年 版 北 京 ： 化 学 工 业 出 版 社 ， 2000： 173

[4] Vlak T. Comparative study of the efficacy of ultrasound and

sonophoresis in the treatment of painful shoulder syndrome. Reumatizam 1999;46:5–11.

[5] 郝劲松 郑俊民，电致孔法透皮给药的研究。中国药学杂志。1998 33（3）:129

[6] 陈小平,电致孔法促进药物的透皮吸收,国外医学药学分册.1999 26(4):222

[7] 高建青 梁文权,促进药物经皮渗透的新方法-----电穿孔技术,国外医学药学分册. 1997 23(17): 42

[8] Kassan DG, Lynch AM, Stiller MJ. Physical enhancement of dermatologic drug delivery: Iontophoresis and phonophoresis. J Am Acad Dermatol 1996;34:657–66.